Lnc-RT Heroᵀᴹ I(Dengan gDNase)(Super Premix untuk sintesis cDNA untaian pertama daripada lncRNA)
Spesifikasi
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (Dengan gDNase) ialah sistem transkripsi terbalik yang dibangunkan khas untuk lncRNA untuk membuang pencemaran DNA genomik dengan cepat.Campuran 5×gDNase boleh membuang baki genom dalam RNA dengan cepat pada suhu 42°C selama 2 minit, dengan berkesan mengelakkan gangguan genom pada keputusan qPCR.
5×L-RT HeroTM Mix mengandungi Foregene LncRNA Reverse Transcriptase yang dibangunkan khas oleh Foregene, yang merupakan jenis baharu transkripase songsang khusus untuk lncRNA dan templat kompleks RNA panjang yang lain, dengan pertalian RNA yang lebih kuat dan kecekapan rakaman pembalikan yang lebih tinggi.Sistem yang dioptimumkan menjadikan kadar transkripsi terbalik lebih cepat dan boleh menyalin templat RNA dengan mudah dengan kandungan GC tinggi dan struktur sekunder yang kompleks.Sintesis cDNA untaian pertama boleh disiapkan pada 42°C dalam masa 15 minit.
Komponen kit
| 5× Campuran gDNase |
| 5× Campuran L-RT HeroTM |
| ddH2O Tanpa RNase |
| Arahan |
Ciri&kelebihan
■Keupayaan cekap untuk mengeluarkan gDNA, yang boleh mengeluarkan gDNA dalam templat dalam masa 2 minit.
■ Ia boleh membalikkan transkripsi lncRNA dengan cekap.Apabila produk transkripsi songsang tertakluk kepada qPCR, nilai Ct adalah lebih rendah daripada sistem transkripsi songsang konvensional.
■ Sistem transkripsi terbalik yang cekap, ia hanya mengambil masa 15 minit untuk menyelesaikan sintesis cDNA untai pertama.
■ Templat kompleks: templat dengan kandungan GC tinggi dan struktur sekunder yang kompleks juga boleh diterbalikkan dengan kecekapan tinggi.
■ Sistem transkripsi songsang sensitiviti tinggi, templat peringkat pg juga boleh mendapatkan cDNA berkualiti tinggi.
■ Sistem transkripsi terbalik mempunyai kestabilan haba yang tinggi, suhu tindak balas optimum ialah 42℃, dan ia masih mempunyai prestasi transkripsi terbalik yang baik pada 50℃.
Aplikasi kit
Analisis kuantitatif relatif lncRNA.
Analisis kuantitatif mutlak lncRNA.
Ia boleh menganalisis RNA surih dengan cepat dan tepat seperti virus RNA.
Transkripsi terbalik templat RNA dengan kandungan GC tinggi atau struktur sekunder yang kompleks.
Aliran kerja
Penyimpanan dan Jangka hayat
Kit hendaklah disimpan pada -20°C. Simpan produk dalam peti sejuk suhu malar pada -20°C sejurus selepas penerimaan.Jika keadaan penyimpanan adalah sesuai, produk tidak akan merendahkan prestasi semasa tempoh sah 1 tahun.
Panduan Analisis Masalah
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-amplifikasi tertentu
1. Reka bentuk primer yang tidak munasabah
Syor: Reka bentuk primer mengikut prinsip reka bentuk primer.
2. Sisa genom.
Cadangan: Pastikan langkah pertama suhu tindak balas penyingkiran gDNA ialah 42°C, dan masa tindak balas juga boleh dilanjutkan kepada 5 minit.
Tiada isyarat penguatan oleh RT-qPCR
1. RNA terdegradasi.
Syor: Bahan untuk pengekstrakan RNA hendaklah segar mungkin, dan RNA berkualiti tinggi dan ketulenan tinggi harus digunakan.
2. RNA mengandungi perencat.
Syor: Inhibitor transkripsi songsang secara amnya termasuk SDS, garam guanidine, EDTA, dsb. Adalah disyorkan untuk mencuci mendakan RNA dengan 70% etanol untuk mengeluarkan perencat.
3. Isu reka bentuk primer.
Syor: Mengikut prinsip reka bentuk primer, reka bentuk semula primer untuk pemeriksaan.
Jalur sasaran muncul dalam kawalan kosong
1. Pencemaran alat atau reagen operasi.
Syor: Semua reagen atau peralatan untuk eksperimen hendaklah diautoklaf.Berhati-hati dan lembut semasa mengendalikan untuk mengelakkan sampel DNA daripada disedut ke dalam pipet atau tumpah keluar dari tiub emparan.
2. Pencemaran berlaku semasa penyediaan sistem tindak balas PCR.
Syor: Ambil langkah berjaga-jaga yang perlu semasa mengendalikan, seperti: memakai sarung tangan lateks, menggunakan petua penapis.Gunakan Campuran PCR Masa Nyata dalam sistem kalis pencemaran.
3. Primer terdegradasi.
Cadangan: Gunakan elektroforesis SDS-PAGE untuk mengesan sama ada primer terdegradasi, dan gantikan dengan primer baharu untuk eksperimen pengesanan pendarfluor.
Arahan manual:
