• facebook
  • linkedin
  • Youtube

1: Gantikan bekalan eksperimen dalam masa

news812 (1) 

Sediakan kawalan negatif (NTC) dan ulangi berkali-kali.Sebaik sahaja didapati terdapat pencemaran produk PCR di makmal, gantikan semua bekalan eksperimen mengikut masa.Seperti: cairkan semula dan sediakan primer, mensterilkan semula hujung pipet, tiub EP, ddH2O, dsb., ganti dengan pipet baharu, dan buat sementara waktu meminjam makmal lain untuk menjalankan eksperimen PCR.Makmal yang tercemar hendaklah berventilasi dan disinari dengan sinar ultraungu sehingga pencemaran produk PCR dihapuskan sebelum meneruskan eksperimen.

2:Melanjutkan masa pendedahan UV

news812 (2)

Perlu diingat bahawa untuk menghapuskan pencemaran DNA, sinaran ultraviolet biasa perlu dilanjutkan selama 2 jam daripada biasa.Walaupun begitu, kesan penyinaran UV terhadap penyingkiran serpihan kecil (di bawah 200bp) pencemaran DNA masih tidak baik.

Panjang gelombang ultraungu (nm) biasanya 254/300nm, dan ia cukup untuk menyinari selama 30 minit.Perlu diingatkan bahawa apabila memilih UV untuk menghapuskan pencemaran sisa produk PCR, panjang produk PCR dan pengedaran bes dalam urutan produk harus dipertimbangkan.Penyinaran UV hanya berkesan untuk serpihan panjang melebihi 500 bp, dan mempunyai sedikit kesan pada serpihan pendek.

Semasa penyinaran UV, asas pirimidin dalam produk PCR akan membentuk dimer.Dimer ini boleh menamatkan sambungan, tetapi tidak semua pirimidin dalam rantai DNA boleh membentuk dimer, dan penyinaran UV juga boleh memecahkan dimer..Tahap pembentukan dimer bergantung pada panjang gelombang UV, jenis dimer pirimidin dan urutan nukleotida yang bersebelahan dengan tapak dimer.Oleh itu, jika serpihan yang dikuatkan PCR adalah kecil, adalah disyorkan untuk menggunakan sistem pencemaran produk anti-PCR UNG.

3:Pemulung pencemaran DNA yang biasa digunakan

news812 (3)

Aerosol mudah dihasilkan apabila pipet ditambah, yang sukar untuk dielakkan, dan ia akan mendap dengan cepat.Oleh itu, sudah pasti pilihan yang baik untuk kerap menggunakan penghapus pencemaran DNA khas untuk mencegah penyebaran pencemaran DNA.

4:Gunakan sistem anti-pencemaran UNG

news812 (4)

Selepas pencemaran produk PCR dikeluarkan, makmal ujian boleh menggunakan sistem pencemaran produk anti-PCR UNG untuk mengelakkan pencemaran produk PCR.Di makmal am, anda boleh melakukan sekatan eksperimen mudah, memisahkan kawasan produk PCR dengan ketat daripada kawasan lain, mewujudkan peraturan dan peraturan makmal tertentu, dan menjalankan latihan yang berkaitan untuk mengelakkan berlakunya pencemaran produk PCR.

Syor: Menubuhkan makmal PCR yang munasabah, mengekalkan persekitaran PCR yang baik, merumuskan prosedur pengendalian PCR standard, dan memupuk kesedaran pengendalian yang ketat bagi penguji adalah kunci untuk mencegah atau mengurangkan pencemaran eksperimen PCR.


Masa siaran: 12 Ogos 2021