• facebook
  • linkedin
  • Youtube

Ujian makmal bermula dengan pengumpulan sampel, dan pengumpulan sampel adalah yang paling mudah untuk diabaikan.Perkara yang paling penting untuk pengumpulan sampel ialah memilih jenis sampel yang betul, menggunakan alat pensampelan yang sesuai, dan menjalankan pengangkutan dan pemprosesan yang munasabah.

I. Jenis sampel

Jenis sampel biasa adalah seperti berikut:

dsafgsd

Kaedah pensampelan boleh merujuk kepada spesifikasi teknikal untuk pemantauan alam sekitar bagi coronavirus baharu dalam pasaran perdagangan pertanian (bazar)”:

1. Sampel sapuan daripada sapuan kerongkong, tangan, pakaian dan objek pengamal lain: ia dikehendaki menggunakan larutan pemeliharaan virus dalam tiub pensampelan virus dan menyusup sepenuhnya ke dalam sapuan kapas pensampelan.Permukaan tanah) digunakan berulang kali dan dibilas lebih daripada 3 kali.Pada masa yang sama, adalah perlu untuk melakukan pensampelan teragih berbilang titik pada permukaan objek sampel.

2. Sampel swab permukaan makanan: Sampel makanan tidak boleh diambil secara langsung.Makanan yang hendak dikumpul hendaklah diasingkan dengan teliti dan disimpan dalam beg pensampelan yang bersih sebelum mengambil sampel swab.Ia dikehendaki menggunakan larutan pengawet virus dalam tiub pensampelan virus, selepas merendam sepenuhnya swab kapas pensampelan, untuk menyapu dan membilas permukaan sampel makanan yang akan dikumpulkan lebih daripada 3 kali berulang kali.Pada masa yang sama, persampelan teragih berbilang titik perlu dilakukan pada permukaan sampel.

3. Sampel kumbahan: Mengikut pengedaran sistem perparitan di pasaran, pilih 2-3 lokasi pensampelan kumbahan, memfokuskan pada pengumpulan rangkaian paip dalaman, arah aliran air di hilir, atau sambungan dengan rangkaian paip perbandaran.Untuk mengumpul sampel swab, rendamkannya ke dalam kumbahan dengan swab kapas pensampelan untuk menjadikannya menyerap kumbahan dan bilas dalam tiub pensampelan lebih daripada 3 kali.Untuk mengumpul sampel kumbahan, gunakan botol plastik polietilena untuk mengumpul 30-500 mL sampel air kumbahan;untuk pengumpulan kumbahan dengan isipadu lebih daripada 500 mL, baldi plastik polietilena atau peralatan pengayaan khas sampel air di tapak boleh digunakan.Pada masa yang sama, adalah perlu untuk menjalankan pensampelan teragih berbilang titik untuk lokasi pensampelan kumbahan.

4. Sampel haiwan: Untuk haiwan hidup, swab pensampelan boleh digunakan untuk mengumpul swab permukaan badan, swab oropharyngeal dan swab dubur, dan sampel najis atau rembesan juga boleh dikumpul dan direkodkan dengan sewajarnya pada helaian rekod.Untuk sampel haiwan yang telah menjalani pengupasan, dsb., gunakan swab kapas untuk mengumpul sampel permukaan badan dan rongga badan mereka.Ia dikehendaki menggunakan penyelesaian pemeliharaan virus dalam tiub pensampelan virus untuk menyusup sepenuhnya swab kapas pensampelan, dan kemudian ulangi penggunaan permukaan sampel makanan yang akan dikumpulkan.Shabu lebih 3 kali.Pada masa yang sama, persampelan teragih berbilang titik perlu dilakukan pada permukaan sampel.

5. Perkakas lain: bekas untuk mengangkut dan membiak haiwan seperti sangkar atau tangki ikan.Mula-mula, perhatikan atau fahami jenis haiwan tertentu yang disimpan dan dibiakkan dalam bekas, dan kumpulkan sampel swab pada dinding dalam bekas atau sampel cecair kandungannya.

6. Kumpul sampel aerosol di kawasan tempat orang ramai berkumpul, kawasan perdagangan tempatan yang kurang pengudaraan, pejabat dan bilik rehat.

II.Alat persampelan
1. Tiub pengumpulan darah
Jika anda perlu melakukan ujian asid nukleik dan sampel antikoagulan kemudian, disyorkan untuk menggunakan saluran darah vakum yang mengandungi antikoagulan EDTA untuk mengumpul darah;untuk sampel serum, adalah disyorkan untuk menggunakan saluran darah vakum tanpa antikoagulan.

fdsgfd

2. Sampel swab

Adalah disyorkan untuk menggunakan swab polipropilena dan bukannya swab kalsium alginat atau swab dengan tiang kayu, kerana ia mungkin mengandungi bahan yang menyahaktifkan virus tertentu dan menghalang ujian PCR.Swab dengan kepala kapas tidak boleh digunakan, kerana gentian kapas mempunyai penjerapan protein yang kuat dan tidak mudah dicairkan ke dalam larutan pengawetan berikutnya.

Dalam "Spesifikasi Teknikal untuk Pengumpulan Campuran 10-dalam-1 dan Pengesanan Asid Nukleik Koronavirus Baharu", jelas ditetapkan bahawa "sapu pensampelan hendaklah diperbuat daripada poliester, nilon dan bahan bukan kapas dan bukan kalsium alginat lain, dan pemegang hendaklah diperbuat daripada bahan bukan kayu.Titik pecah adalah kira-kira 3cm dari bahagian atas kepala swab, yang mudah pecah.”

CDC di Amerika Syarikat juga menyebut “Gunakan hanya swab gentian sintetik dengan aci plastik atau wayar.Jangan gunakan sapuan kalsium alginat atau sapu dengan batang kayu,kerana ia mungkin mengandungi bahan yang menyahaktifkan sesetengah virus dan menghalang ujian PCR.

Pada masa ini digunakan secara meluas ialah swab berkelompok nilon steril pakai buang yang digabungkan dengan batang plastik.Swab berkelompok mempunyai kadar penyerapan dan pelepasan air yang lebih baik.Mengikut tapak persampelan yang berbeza, kepala swab juga mempunyai saiz dan gentian yang berbeza.Ketebalannya.”

fsdg

3. Contoh penyelesaian pemeliharaan pengangkutan

Penyelesaian pemeliharaan penyahaktifan virus: jumlah kepekatan garam guanidine yang sesuai dan pelbagai komponen lisis virus boleh secara langsung melisiskan virus untuk membebaskan asid nukleik, menyahaktifkan RNase dan DNase, dan memastikan integriti asid nukleik, yang boleh digunakan untuk pengesanan qPCR berikutnya.Ia tidak boleh digunakan untuk penanaman dan pengasingan virus.

Penyelesaian pengangkutan dan pemeliharaan virus: mengandungi garam, asid amino, vitamin, glukosa dan protein yang diperlukan untuk kemandirian virus, yang boleh mengekalkan aktiviti virus.Ia boleh digunakan untuk pengekstrakan asid nukleik dan pengesanan virus pada masa hadapan, dan ia juga boleh digunakan untuk penanaman dan pengasingan virus.

4. Tiub pemeliharaan sampel dan beg sampel

Tiub simpanan sampel hendaklah tiub plastik steril dengan penutup skru yang tidak menyerap asid nukleik.Setiap tiub sampel hendaklah ditutup dengan beg sampel untuk mengelakkan kebocoran dan pencemaran sampel.

fdsdf

III.Bahan pengganggu dalam sampel

Bahan pengganggu dalam eksperimen PCR

1. gangguan endogen

Bahan yang terdapat dalam sampel badan boleh mengganggu pengesanan bahan lain.

darah:heme (>1mg/ml), hemin (>0.1ng/μl), trigliserida, IgG, dsb.;

Air kencing:Urea (20mM);

najis:polisakarida tumbuhan, kolat;

Tisu:protease, kolagen;

susu: protease, ion kalsium;

Dadah: antibiotik, ubat antivirus, hormon, dll.

lain.

2. gangguan eksogen

Ia berasal dari bahan yang boleh mengganggu pengesanan bahan lain secara in vitro.Contoh bahan tambahan dan bahan yang boleh dihubungi semasa pengumpulan dan pemprosesan sampel:

Bekalan ujian: gel pemisah serum, bekas pengumpulan sampel dan penyumbat getah, kateter, cecair siram kateter, serbuk sarung tangan, dsb.

Antikoagulan: heparin (>0.1 U/mL), EDTA (>0.5 mM), dsb.;

Pelarut organik: isopropanol (>0.1 IU/ml), betaine, dimetil sulfoksida, formamida, gliserin, PEG, dsb.;

Pembasmi kuman: alkohol (etanol>1%), aldehid, fenol (fenol>0.2%), peroksida, asid kuat (HCL), alkali kuat (NaOH), dll.;

Bahan pencuci:SDS (>0.005%);

tanah: Humus

Bahan pewarna: Indigo

lain.

Di bawah keadaan pensampelan luar yang sebenar, seperti mengumpul sampel persekitaran, sampel mungkin mengandungi pelbagai bahan yang mengganggu, dan komposisi bahan yang mengganggu di setiap lokasi adalah berbeza, yang memerlukan eksperimen gangguan PCR dijalankan mengikut keadaan setempat.

IV.Keadaan penyimpanan dan pengangkutan sampel

Spesimen klinikal yang baru dikumpul hendaklah dihantar ke makmal dalam masa 2 hingga 4 jam selepas pengumpulan pada suhu 2°C hingga 8°C.Simpan pada suhu 4 ℃ dalam masa 24 jam.Spesimen yang digunakan untuk pengasingan virus dan pengesanan asid nukleik harus diuji secepat mungkin.Spesimen yang boleh diuji dalam masa 24 jam boleh disimpan pada suhu 4°C;spesimen yang tidak dapat dikesan dalam masa 24 jam hendaklah disimpan pada -70°C atau lebih rendah (jika tidak- Simpan pada suhu 70°C dalam peti sejuk pada -20°C).

Ringkasan:Pengumpulan, pengangkutan dan penyimpanan sampel yang standard adalah penting untuk ujian seterusnya.Negatif palsu banyak ujian makmal disebabkan oleh pengumpulan, pengangkutan dan penyimpanan sampel yang tidak betul yang membawa kepada degradasi asid nukleik virus.Walau bagaimanapun, banyak makmal masih mengabaikan kepentingan pensampelan.Saya harap artikel ini dapat membangkitkan perhatian semua orang terhadap persampelan dan membuat persampelan yang lebih saintifik dan munasabah!

Produk berkaitan:

Kit Pengesanan Asid Nukleik Varian SARS-CoV-2 (I) (Kaedah Pendarfluor Multiplex PCR)-Untuk Pengesanan Mutan Dari Brazil, Afrika Selatan dan UK


Masa siaran: Sep-17-2021