• facebook
  • linkedin
  • Youtube
page_banner

Kit Pengasingan RNA Jumlah Tumbuhan Ditambah Kit Pemurnian RNA Jumlah untuk Tumbuhan Kaya dengan Polisakarida dan Polifenol

Penerangan Kit:

 

Cat.No.RE-05021/05022/05024

 

Untuk penulenan jumlah RNA daripada sampel tumbuhan am yang mengandungi komponen polisakarida dan polifenol yang tinggi.

Ekstrak dengan cepat jumlah RNA berkualiti tinggi daripada sampel tumbuhan dengan kandungan polisakarida dan polifenol yang tinggi.

Bebas RNase Menggunakan Lajur Pembersihan DNA

Mudah—semua operasi selesai pada suhu bilik

Cepat—operasi boleh diselesaikan dalam masa 30 minit

Selamat—tiada reagen organik digunakan kekuatan foregene


Butiran Produk

Tag Produk

Soalan Lazim

MUAT TURUN SUMBER

Spesifikasi

50 Persediaan, 200 Persediaan

Kit ini menggunakan lajur putaran dan formula yang dibangunkan oleh Foregene, yang boleh mengekstrak jumlah RNA ketulenan tinggi dan berkualiti tinggi dengan cekap daripada pelbagai tisu tumbuhan dengan kandungan polisakarida atau polifenol yang tinggi.Ia menyediakan lajur Pembersihan DNA yang boleh mengeluarkan DNA genom dengan mudah daripada supernatan dan lisat tisu.Lajur RNA sahaja boleh mengikat RNA dengan berkesan.Kit boleh memproses sejumlah besar sampel pada masa yang sama.

Keseluruhan sistem tidak mengandungi RNase, jadi RNA yang telah dimurnikan tidak akan terdegradasi.Penampan PRW1 dan Penampan PRW2 boleh memastikan bahawa RNA yang diperolehi tidak dicemari oleh protein, DNA, ion dan sebatian organik.

Komponen kit

Penampan PSL1, Penampan PS, Penampan PSL2

Penampan PRW1, Penampan PRW2

ddH Tanpa RNase2O, Lajur Pembersihan DNA

Lajur RNA-Sahaja

Ciri&kelebihan

■ Beroperasi pada suhu bilik (15-25℃) sepanjang keseluruhan proses, tanpa mandi ais dan sentrifugasi suhu rendah.
■ Kit lengkap Bebas RNase, tidak perlu risau tentang kemerosotan RNA.
■ Amat sesuai untuk penulenan RNA daripada sampel tumbuhan polisakarida dan polifenol.
■ Lajur Pembersihan DNA secara khusus mengikat DNA, supaya kit boleh membuang pencemaran DNA genomik tanpa menambah DNase.
■ Hasil RNA yang tinggi: Lajur RNA sahaja dan formula unik boleh membersihkan RNA dengan cekap.
■ Kelajuan pantas: mudah dikendalikan dan boleh disiapkan dalam masa 30 minit.
■ Keselamatan: tiada reagen organik diperlukan.
■ Kualiti tinggi: Serpihan RNA yang telah dimurnikan mempunyai ketulenan tinggi, bebas daripada protein dan kekotoran lain, dan boleh memenuhi pelbagai aplikasi percubaan hiliran.

Parameter produk

■ Aplikasi hiliran: sintesis cDNA untaian pertama, RT-PCR, pengklonan molekul, Northern Blot, dsb.
■ Sampel: Tisu tumbuhan segar atau beku polisakarida dan polifenol
■ Dos: 50mg tisu tumbuhan
■ Kapasiti mengikat RNA maksimum lajur penulenan: 80 μg
■ Isipadu elusi: 50-200 μl

Aplikasi kit

Ia sesuai untuk pengekstrakan dan penulenan jumlah RNA daripada sampel tisu tumbuhan segar atau beku (terutamanya tisu daun tumbuhan segar) dengan kandungan polisakarida dan polifenol yang tinggi.

Aliran kerja

aliran kerja ringkas RNA jumlah tumbuhan

Gambar rajah

Kit Pengasingan RNA Jumlah Tumbuhan Plus 6

Kit Pengasingan RNA Jumlah Tumbuhan Plus memproses 50mg daun segar polisakarida dan polifenol, dan 5% RNA yang telah dimurnikan telah diuji dengan elektroforesis.
1: Pisang
2: Ginkgo
3: Kapas
4: Delima

Penyimpanan dan Jangka hayat

Kit ini boleh disimpan selama 24 bulan dalam keadaan kering pada suhu bilik (15-25 ℃);jika ia perlu disimpan untuk masa yang lebih lama, ia boleh disimpan dalam 2–8 ℃.
Penampan PSL1 boleh diletakkan pada suhu 4 ℃ selama 1 bulan selepas menambah β-mercaptoethanol (disyorkan untuk menambahnya pada masa percubaan yang sama).


  • Sebelumnya:
  • Seterusnya:

  • Lajur dipalamkan

    Selepas lajur dipasang, hasil RNA dikurangkan atau bahkan mustahil untuk membersihkan RNA, dan jisim RNA yang diperoleh adalah rendah.

    Analisis punca biasa:

    1. Rehat sampel tidak menyeluruh.

    Pemecahan sampel tidak sepenuhnya menyebabkan KOLUM PEMBERSIH DNA disekat, sekaligus menjejaskan hasil dan kualiti RNA.Kami mengesyorkan operasi pengisaran pantas dalam nitrogen cecair yang mencukupi apabila anda memecahkan sampel, Cuba hancurkan dinding sel sampel, membran sel dan tisu lain.Untuk sampel tumbuhan polisakarida poliol, kami mengesyorkan agar anda menggunakan Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

    2. Apabila menyedut supernatan sampel yang diasingkan dengan Lajur Pembersihan DNA, kemungkinan mendakan terserpihan sel boleh dihidu.

    Sedimen pecahan sel yang diambil akan menyebabkan Lajur RNA SAHAJA yang akan disekat apabila operasi penjerapan RNA dilakukan (lihat langkah 6).Kami mengesyorkan anda dengan berhati-hati apabila menyedut supernatan ini untuk mengelakkan serpihan sel disedut.

    3. Jumlah permulaan sampel terlalu banyak.

    Penggunaan sampel yang berlebihan akan mengakibatkan pemecahan sampel yang tidak lengkap atau lisis sel yang tidak lengkap oleh Penampan PSL1, mengakibatkan penyumbatan lajur penulenan semasa penulenan.Kit Pengasingan RNA Jumlah Tumbuhan Setiap sampel operasi tulen tunggal ialah 50 mg.Untuk sampel tumbuhan polisakarida poliol, kami mengesyorkan anda mencuba Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

    4. Suhu emparan terlalu rendah.

    Keseluruhan proses pengasingan dan penulenan RNA dijalankan pada suhu bilik (20-25°C), kecuali tisu sampel dipecahkan oleh nitrogen cecair. Suhu sesetengah emparan kriogenik adalah lebih rendah daripada 20, yang boleh menyebabkan tersumbat Lajur Pembersihan DNA dan/atau Lajur RNA Sahaja.Jika ini berlaku, tetapkan suhu emparan kepada 20-25, danpastikan campuran lisis dan/atau supernatan yang ditambah etanol dipanaskan hingga 37°C.

    Tiada RNA yang diekstrak atau hasil RNA adalah rendah

    Biasanya terdapat banyak faktor yang mempengaruhi kecekapan pemulihan, seperti: kandungan RNA sampel, kaedah operasi, isipadu elusi, dsb.

    Analisis punca biasa seperti di bawah:

    1. Mandian ais atau sentrifugasi suhu rendah (4°C) dilakukan semasa operasi.

    Cadangan: Beroperasi pada suhu bilik (15-25°C) dalam keseluruhan proses, jangan lakukan mandi ais dan sentrifugasi suhu rendah.

    2. RNA telah terdegradasi kerana pemeliharaan sampel yang tidak betul atau pemeliharaan jangka panjang sampel.

    Syor: Sampel yang baru dikumpul hendaklah dibekukan dengan cepat dalam nitrogen cecair, dan kemudian disimpan pada -80°C untuk masa yang lama, elakkan pembekuan dan pencairan sampel yang berulang;atau segera rendam sampel dalam larutan penstabil RNA RNAlater (sampel haiwan).

    3.Pemecahan sampel dan lisis yang tidak mencukupi membawa kepada penyumbatan lajur penulenan.

    Cadangan: Apabila mengisar tisu, sila pastikan bahawa tisu dikisar secukupnya, dan segera pindahkan ke Penampan PSL1 yang telah disediakan terlebih dahulu (sahkan bahawa bahagian β-ME yang betul telah ditambah, lihat langkah 1 prosedur).

    4.Eluen telah ditambah dengan tidak betul.

    Cadangan: Pastikan ddH2O Bebas RNase dititiskan ke tengah-tengah membran lajur penulenan.

    5. Isipadu etanol mutlak yang betul tidak ditambahkan pada Penampan PSL2 atau Penampan PRW2.

    Cadangan: Sila ikut arahan, tambahkan isipadu etanol mutlak yang betul kepada Penampan PSL2 dan Penampan PRW2 dan gaul rata sebelum kit digunakan.

    6. Jumlah sampel tisu tidak sesuai.

    Cadangan: Gunakan 50 mg tisu setiap 500 μl Penampan PSL1.Menggunakan terlalu banyak tisu akan mengurangkan jumlah RNA yang diekstrak dan ketulenan RNA yang terhasil juga akan berkurangan.Kami amat mengesyorkan bahawa dos sampel awal tidak boleh melebihi 50 mg setiap operasi pengekstrakan RNA.

    7. Isipadu elusi yang tidak sesuai atau elusi yang tidak lengkap.

    Cadangan: Isipadu eluen lajur penulenan ialah 50-200 μl;jika kesan elusi tidak memuaskan, adalah disyorkan untuk melanjutkan masa pada suhu bilik selepas menambah ddH2O Bebas RNase yang dipanaskan, seperti 5-10min.

    8. Lajur penulenan mempunyai sisa etanol selepas dibasuh dengan BufferPRW2.

    Cadangan: Jika tiub kosong disentrifugasi selama 1 minit dan masih terdapat baki etanol selepas dicuci dalam Penampan PRW2, anda boleh meningkatkan masa sentrifugasi tiub kosong kepada 2 minit, atau letakkan lajur penulenan pada suhu bilik selama 5 minit untuk mengeluarkan sepenuhnya sisa etanol.

    9. Kit telah digunakan dengan tidak betul.

    Cadangan: Untuk sampel tumbuhan polisakarida polifenolik, menggunakan kit biasa seperti Kit Pengasingan RNA Jumlah Tumbuhan mungkin tidak dapat memperoleh sampel RNA yang ideal.Kami mengesyorkan anda menggunakan Plant Total RNA IsolationKit Plus, yang direka khas untuk sampel tumbuhan polyphenolic polysaccharide.Kit yang dibangunkan khas untuk mengekstrak RNA daripada sampel tumbuhan polifenol dan polisakarida.

    Nilai OD260/OD280 adalah rendah

    Elusi RNA dengan ddH2O dan digunakan untuk bacaan spektrofotometer menghasilkan nilai OD260/OD280 yang rendah.Kami mengesyorkan menggunakan 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (bukannya ddH2O Bebas RNase untuk mengelusi RNA) untuk mendapatkan nilai OD260/OD280 yang agak betul, lihat “Ujian Kepekatan dan Pembersihan RNA” pada halaman 19.

    RNA yang telah dimurnikan terdegradasi

    Kualiti RNA yang telah disucikan adalah berkaitan dengan faktor seperti pemeliharaan sampel, pencemaran RNase, dan manipulasi.

    Analisis punca biasa:

    1.Sampel tisu tidak disimpan dalam masa selepas pengumpulan.

    Syor: Jika sampel tisu tidak digunakan dalam masa selepas pengumpulan, sila simpannya dalam nitrogen cecair pada suhu rendah dengan segera atau pindahkannya ke -80°C untuk penyimpanan jangka panjang selepas beku cepat dalam nitrogen cecair, atau segera rendam sampel dalam larutan penstabil RNA RNAlater (sampel haiwan ).Untuk pengekstrakan RNA, cuba gunakan sampel tisu yang baru dikumpul.

    2. Pembekuan dan pencairan sampel tisu berulang kali.

    Cadangan: Apabila menyimpan sampel tisu, sebaiknya potong kecil-kecil untuk pemeliharaan, dan keluarkan sebahagian daripadanya apabila menggunakannya untuk mengelakkan kemerosotan RNA yang disebabkan oleh pembekuan dan pencairan sampel yang berulang.

    3. RNase diperkenalkan di dalam bilik gerakan atau sarung tangan pakai buang, topeng, dsb.

    Cadangan: Eksperimen pengekstrakan RNA paling baik dilakukan dalam operasi RNA yang berasingan, dan meja makmal harus dibersihkan sebelum eksperimen, dan sarung tangan pakai buang dan topeng harus dipakai semasa eksperimen untuk mengelakkan degradasi RNA yang disebabkan oleh pengenalan RNase ke tahap yang paling besar.

    4. Reagen tercemar oleh RNase semasa digunakan.

    Cadangan: Gantikan dengan siri baharu kit pengekstrakan RNA jumlah tumbuhan untuk eksperimen berkaitan.

    5. Tiub emparan dan hujung pipet yang digunakan untuk manipulasi RNA tercemar dengan RNase.

    Cadangan: Pastikan tiub emparan, hujung pipet, pipet, dsb. yang digunakan dalam pengekstrakan RNA semuanya Bebas RNase.

    Manual Arahan:

    Manual Arahan Kit Pengasingan RNA Jumlah Tumbuhan Plus

     

    Tulis mesej anda di sini dan hantarkan kepada kami