QuickEasyᵀᴹ Kit PCR Masa Nyata-Taqman
Penerangan
2× QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman disediakan oleh QuickEasyTMKit PCR Masa Nyata-Taqman kit ialah sistem campuran induk generasi baharu yang direka untuk tindak balas penguatan PCR Masa Nyata menggunakan probe pendarfluor tertentu.Teras Foregene HS Taq DNA Polymerase adalah berdasarkan pengubahsuaian Antibodi, digunakan bersama dengan sistem PCR yang dioptimumkan lagi Foregene, mempunyai kekhususan dan kecekapan amplifikasi yang lebih tinggi.Berbanding dengan campuran PCR biasa, ia mempunyai keupayaan amplifikasi yang lebih kuat dan kadar ketidakpadanan yang lebih rendah.Ia boleh digunakan dalam tindak balas PCR kuantitatif pendarfluor untuk mengurangkan penguatan tidak spesifik dan meningkatkan ketepatan PCR.Ia boleh meningkatkan kekhususan produk dan sensitiviti tindak balas.Pada masa yang sama, ROX disediakan sebagai pewarna rujukan dalaman.
QuickEasyTMKit PCR Masa Nyata-Taqman mempunyai skop aplikasi yang luas kepada jumlah templat, dan boleh memperoleh lengkung standard yang baik di kawasan kuantitatif yang berbeza, dan boleh mengukur dan mengesan gen sasaran dengan tepat dengan kebolehulangan yang baik dan keyakinan tinggi.
Spesifikasi
200 Persediaan,500 Persediaan,1000 Persediaan,2000 Persediaan
Komponen kit
QuickEasyTMPCR Kit-Taqman Masa Nyata(20μlsistem) | ||||
Kandungan kit | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 Persediaan | 500 Persediaan | 1000 Persediaan | 2000 Persediaan | |
2×CepatMudahTM PCR sebenar Campurkan-Taqman | 1 mL×2 | 1.7 mL×3 | 1.7 mL×6 | 1.7 mL×12 |
20×Pewarna Rujukan ROX | 200μL | 0.5 mL | 1 mL | 1 mL×2 |
ddH Tanpa Dnase2O | 1.7 mL | 1.7 mL×2 | 10 mL | 20 mL |
KALAU AWAK | 1sekeping | 1sekeping | 1sekeping | 1sekeping |
Ciri&kelebihan
■ Sistem pengoptimuman PCR yang unik menjadikan 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman lebih serasi.
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymerase mempunyai kecekapan amplifikasi yang lebih tinggi, sensitiviti amplifikasi yang lebih tinggi dan kekhususan amplifikasi yang lebih tinggi.
■ 2× QuickEasyTM Campuran PCR Sebenar -Taqman menggunakan sistem unik yang dioptimumkan oleh Foregene untuk meningkatkan sensitiviti dan kekhususan pengesanan probe khusus jujukan, yang boleh digunakan untuk genotaip dan penentuan variasi nombor salinan dan mendapatkan hasil yang tepat.
■ Produk ini disertakan dengan pewarna rujukan dalaman ROX, yang boleh digunakan untuk menghapuskan latar belakang isyarat dan ralat isyarat antara telaga, yang mudah digunakan oleh pelanggan dalam pelbagai jenis instrumen PCR kuantitatif.
Aplikasi kit
■ PCR kuantitatif pendarfluor untuk analisis kuantitatif templat;
■ Cpenguatan PCR konvensional;
■ Boleh digunakan untuk pengesanan alel.
Penyimpanan dan Jangka hayat
Kit hendaklah disimpan pada -20°C dalam gelap;jika ia digunakan dengan kerap, ia juga boleh disimpan pada suhu 4°C untuk jangka masa yang singkat (habis dalam masa 10 hari).
Prinsip reka bentuk primer PCR Masa Nyata
Primer Hadapan dan Primer Songsang
Untuk PCR Masa Nyata, reka bentuk primer adalah sangat penting.Primer berkaitan dengan kekhususan dan kecekapan penguatan PCR, dan boleh direka bentuk dengan merujuk kepada prinsip berikut:
Panjang primer: 18-30bp.
Kandungan GC: 40-60%.
Nilai Tm: Perisian reka bentuk primer, seperti Primer 5, boleh memberikan nilai Tm primer.Nilai Tm primer huluan dan hiliran hendaklah sedekat mungkin.Formula pengiraan Tm juga boleh digunakan: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Apabila melakukan PCR, suhu di bawah nilai Tm primer 5 °C biasanya dipilih sebagai suhu penyepuhlindapan (peningkatan yang sepadan dalam suhu penyepuhlindapan boleh meningkatkan kekhususan tindak balas PCR).
Primer dan produk PCR:
Panjang produk penguatan PCR primer reka bentuk adalah sebaik-baiknya 100-150bp.
Primer reka bentuk di kawasan struktur sekunder templat harus dielakkan sebanyak mungkin.
Elakkan pembentukan 2 atau lebih asas pelengkap antara hujung 3′ primer hulu dan hilir.
Pangkalan terminal primer 3′ tidak boleh hadir dengan 3 G atau C tambahan berturut-turut.
Primer itu sendiri tidak boleh mempunyai struktur pelengkap, jika tidak, struktur jepit rambut akan terbentuk, menjejaskan penguatan PCR.
ATCG harus diagihkan sekata mungkin dalam urutan primer, dan pangkalan terminal 3′ harus dielakkan sebagai T.
Lampiran 1:Pek tambahan komponen Kit RT-qPCR Langsung Sel
1.Penyelesaian Lisis Sel
| |||
Komponen kit (sistem lisis 24 telaga / telaga) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Bahagiansaya | Penampan CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Penampan ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
BahagianII | Pemadam DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
2. Campuran RT
| |
Komponen kit (sistem tindak balas 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Campuran RT Terus | 800 μl |
ddH Tanpa RNase2O | 1.7 ml × 2 |
| ||
Komponen kit (sistem tindak balas 20 μl) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Campuran qPCR terus-SYBR | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
Pewarna Rujukan 50× ROX | 40 μl | 200 μl |
ddH Tanpa RNase2O | 1.7 ml | 10 ml |