Kit Pengasingan DNA&RNA Virus Kit Penyediaan Penulenan Pengekstrakan DNA dan RNA Virus
Spesifikasi
50 Persediaan, 200 Persediaan
Kit Pengasingan Pengekstrakan Penucian Asid Nukleik RNA virus menggunakan lajur putaran dan formula yang dibangunkan oleh Foregene, yang boleh mengekstrak RNA virus ketulenan tinggi dan berkualiti tinggi dengan cekap daripada sampel seperti plasma, serum, cecair badan bebas sel dan supernatan kultur sel.Kit ini secara khusus menambah Linear Acrylamide, yang boleh menangkap sejumlah kecil RNA daripada sampel dengan mudah.Lajur RNA-Sahaja boleh mengikat RNA dengan cekap.Kit boleh memproses sejumlah besar sampel pada masa yang sama.
Keseluruhan kit tidak mengandungi RNase, jadi RNA yang telah dimurnikan tidak akan terdegradasi.Penampan viRW1 dan Penampan viRW2 boleh memastikan asid nukleik virus yang diperolehi bebas daripada protein, nuklease atau kekotoran lain, yang boleh digunakan terus untuk eksperimen biologi molekul hiliran.
Komponen kit
Akrilamida Linear |
Penampan DRL |
Penampan RW1, Penampan RW2 |
ddH Tanpa RNase2O |
Lajur DNA/RNA |
Arahan |
Ciri&kelebihan
■ Beroperasi pada suhu bilik (15-25℃) sepanjang keseluruhan proses, tanpa mandi ais dan sentrifugasi suhu rendah.
■ Kit lengkap Bebas RNase, tidak perlu risau tentang kemerosotan RNA.
■ Hasil asid nukleik yang tinggi: Lajur DNA/RNA sahaja dan formula unik boleh membersihkan DNA dan RNA dengan cekap.
■ Kapasiti pemprosesan sampel yang besar: sehingga 200μl sampel boleh diproses setiap kali.
■ Kelajuan pantas: mudah dikendalikan dan boleh disiapkan dalam masa 20 minit.
■ Keselamatan: tiada reagen organik diperlukan.
■ Kualiti tinggi: Serpihan RNA yang telah dimurnikan mempunyai ketulenan tinggi, bebas daripada protein dan kekotoran lain, dan boleh memenuhi pelbagai aplikasi percubaan hiliran.
Aplikasi kit
Ia sesuai untuk pengekstrakan dan penulenan asid nukleik virus dalam sampel seperti plasma, serum, cecair badan bebas sel dan supernatan kultur sel.
Aliran kerja
Gambar rajah
Penyimpanan dan Jangka hayat
■ Kit ini boleh disimpan selama 24 bulan dalam keadaan kering pada suhu bilik (15-25℃);jika ia perlu disimpan untuk masa yang lebih lama, ia boleh disimpan dalam 2–8 ℃.
■ Larutan Akrilamida Linear boleh disimpan pada suhu bilik selama 7 hari;selepas menerima kit, sila keluarkan dan simpan pada -20°C.
■ Selepas menambah Linear Acrylamide pada Buffer DRL, ia boleh disimpan pada suhu 2-8°C sehingga 48j.Sila gunakan penyelesaian siap sedia.
Panduan Analisis Masalah
Berikut ialah analisis masalah yang mungkin dihadapi dalam pengekstrakan DNA/RNA virus, dengan harapan dapat membantu eksperimen anda.Di samping itu, untuk masalah eksperimen atau teknikal lain selain daripada arahan operasi dan analisis masalah, kami mempunyai sokongan teknikal khusus untuk membantu anda.Jika anda mempunyai sebarang keperluan, sila hubungi kami: 028-83360257 atau E-mel:
Tech@foregene.com.
Tiada pengekstrakan asid nukleik atau hasil asid nukleik yang rendah
Biasanya terdapat banyak faktor yang mempengaruhi kecekapan pemulihan, seperti: sampel kandungan asid nukleik, kaedah operasi, isipadu elusi, dsb.
Analisis punca biasa:
1. Mandian ais atau sentrifugasi suhu rendah (4°C) dilakukan semasa prosedur.
Cadangan: Beroperasi pada suhu bilik (15-25°C) sepanjang keseluruhan proses, jangan mandi ais dan sentrifugasi suhu rendah.
2. Sampel disimpan dengan tidak betul atau sampel disimpan terlalu lama.
Syor: Simpan sampel pada -80°C dan elakkan pembekuan dan pencairan berulang;cuba gunakan sampel yang baru dikumpul untuk pengekstrakan asid nukleik.
3. Lisis sampel tidak mencukupi.
Syor: Sila pastikan bahawa sampel dan larutan kerja lisis dicampur dengan sempurna dan diinkubasi pada suhu bilik (15-25°C) selama 10 minit.
4. Penambahan eluen yang salah.
Cadangan: Pastikan ddH2O Bebas RNase ditambah setitik demi setitik ke tengah membran lajur penulenan, dan jangan jatuhkannya pada gelang lajur penulenan.
5. Isipadu etanol mutlak yang betul tidak ditambahkan pada Penampan RW2.
Cadangan: Sila ikut arahan, tambahkan isipadu etanol mutlak yang betul kepada Penampan RW2 dan gaul rata sebelum menggunakan kit.
6. Isipadu sampel yang tidak sesuai.
Cadangan: 200µl sampel diproses untuk setiap 500µl Buffer DRL.Pemprosesan sampel yang berlebihan akan mengakibatkan hasil pengekstrakan asid nukleik yang lebih rendah.
7. Isipadu elusi yang tidak sesuai atau elusi yang tidak lengkap.
Syor: Isipadu eluen lajur penulenan ialah 30-50μl;jika kesan elusi tidak memuaskan, adalah disyorkan untuk melanjutkan masa pada suhu bilik selepas menambah ddH2O Bebas RNase yang dipanaskan, seperti 5-10min.
8. Etanol kekal pada lajur selepas dibasuh dengan Penampan RW2.
Cadangan: Jika etanol kekal selepas sentrifugasi dengan Penampan RW2 selama 2 minit, lajur boleh diletakkan pada suhu bilik selama 5 minit selepas sentrifugasi untuk mengeluarkan sepenuhnya sisa etanol.
Asid nukleik yang telah dimurnikan terdegradasi
Kualiti asid nukleik yang dimurnikan adalah berkaitan dengan pemeliharaan sampel, pencemaran RNase, operasi dan faktor lain.Analisis punca biasa:
1. Sampel yang dikumpul tidak disimpan dalam masa.
Cadangan: Jika sampel tidak digunakan dalam masa selepas pengumpulan, sila simpan pada -80°C pada suhu rendah dengan segera.Untuk pengekstrakan RNA, cuba gunakan sampel yang baru dikumpul.
2. Kumpul sampel dan beku dan cair berulang kali.
Cadangan: Elakkan pembekuan dan pencairan (tidak lebih daripada sekali) semasa pengumpulan dan penyimpanan sampel, jika tidak, hasil asid nukleik akan berkurangan.
3. RNase diperkenalkan di dalam bilik pembedahan atau sarung tangan pakai buang, topeng dan sebagainya tidak dipakai.
Syor: Eksperimen pengekstrakan RNA paling baik dilakukan di dalam bilik operasi RNA yang berasingan, dan meja makmal perlu dibersihkan sebelum eksperimen.
Pakai sarung tangan dan topeng pakai buang semasa eksperimen untuk mengelakkan degradasi RNA yang disebabkan oleh pengenalan RNase ke tahap yang paling tinggi.
4. Reagen telah tercemar dengan RNase semasa digunakan.
Syor: Gantikan dengan Kit Pengasingan DNA/RNA Viral baharu untuk eksperimen berkaitan.
5. Tiub emparan dan hujung pipet yang digunakan untuk manipulasi RNA tercemar dengan RNase.
Cadangan: Pastikan tiub emparan, hujung pipet, pipet, dsb. yang digunakan untuk pengekstrakan RNA semuanya Bebas RNase.
Asid nukleik tulen menjejaskan eksperimen hiliran
DNA dan RNA disucikan oleh lajur penulenan, jika ion garam dan kandungan protein terlalu tinggi, ia akan menjejaskan eksperimen hiliran, seperti: penguatan PCR, transkripsi terbalik, dll.
1. DNA dan RNA yang dicairkan mempunyai baki ion garam.
Cadangan: Pastikan isipadu etanol mutlak yang betul ditambahkan pada Penampan RW2, dan basuh lajur penulenan dua kali pada kelajuan pengemparan yang dinyatakan dalam arahan pengendalian;Lakukan sentrifugasi untuk meminimumkan pencemaran ion garam.
2. DNA dan RNA yang dicairkan mempunyai sisa etanol.
Cadangan: Selepas mengesahkan pencucian dengan Penampan RW2, lakukan sentrifugasi tiub kosong pada kelajuan sentrifugasi dalam arahan pengendalian;jika masih terdapat sisa etanol, anda boleh mengempar tiub kosong dan kemudian meletakkannya pada suhu bilik selama 5 minit untuk mengeluarkan sisa etanol ke tahap yang paling besar.
Manual Arahan:
Manual Arahan Kit Pengasingan DNA&RNA Virus