pengenalan:

RNA, nama saintifik ribonucleic acid, singkatannya berasal dari RiboNucleic Acid, adalah sejenis asid nukleik yang terbentuk dengan menghubungkan sekurang-kurangnya berpuluh-puluh ribonukleotida melalui ikatan fosfodiester.

Premis penerokaan RNA adalah untuk mengekstrak Total RNA bebas pencemaran, dan prinsip asas pengekstrakan RNA secara kasar boleh diringkaskan seperti berikut:

1. Gangguan sel dahulu

2. Kemudian keluarkan kekotoran makromolekul (protein, lipid, DNA, dll.)

3. Akhir sekali, RNA dimendakkan semasa mengeluarkan garam dan pelarut organik, dan seterusnya memurnikan RNA

Kaedah pengekstrakan dahulu dan sekarang

Generasi pertama kaedah pengekstrakan RNA ialah kaedah pemendakan TRIzol (reagen yang digunakan termasuk guanidine isothiocyanate, fenol, kloroform, dll) dicipta oleh datuk bernama Piotr Chomczynski dan nenek Nicoletta Sacchi, kerana ciptaan ini membolehkan penyelidikan pengekstrakan RNA Pantas dan mudah, sejak itu memulakan peningkatan RNA.

Kemudian, Datuk menjual paten ini kepada Invitrogen, dan Invitrogen mempromosikan kaedah ini kepada dunia dan menjadi kaedah yang digunakan secara meluas.

Kemudian, Invitrogen telah diperoleh oleh Thermo!

Produk perwakilan: Reagen TRIzol Invitrogen

Walau bagaimanapun, kaedah pemendakan TRIzol memerlukan beberapa pemendakan dan pengekstrakan RNA, dan reagen yang digunakan adalah toksik dan mengambil masa yang lama untuk beroperasi.

Oleh itu, kaedah penulenan lajur-enzim generasi kedua wujud, menggunakan membran gel silika sebagai bahan penjerapan asid nukleik khusus untuk memaksimumkan pemulihan RNA dalam sampel sambil mengeluarkan kekotoran lain.

Kaedah generasi kedua memudahkan operasi berdasarkan prestasi yang stabil, mengurangkan faktor risiko, dan meningkatkan kecekapan pengekstrakan RNA.

Produk wakil: QIAGEN RNeasy dan kebanyakan produk domestik

Walau bagaimanapun, kedua-dua kaedah generasi pertama dan kedua memerlukan penggunaan DNase untuk membuang pencemaran DNA, yang membawa sedikit kesulitan kepada eksperimen hiliran berikutnya.DNase sisa akan mengurangkan kecekapan transkripsi terbalik dan mengurangkan sintesis cDNA untaian pertama, dengan itu menjejaskan ketepatan keputusan.

Oleh itu, kaedah pengekstrakan generasi ketiga dioptimumkan berdasarkan generasi kedua.Percubaan tidak perlu menambah sebarang enzim, dan RNA boleh diperolehi dengan mudah dengan hanya dua lajur.

Lajur 1: Lajur Pembersihan DNA untuk mengosongkan DNA

Lajur 2: Lajur RNA sahaja menjerap dan memulihkan RNA secara khusus

Operasi mudah sedemikian bukan sahaja menjimatkan masa, tetapi juga memudahkan operasi eksperimen hiliran!

Produk wakil: QIAGEN RNeasy Plus danForegeneProduk siri penulenan RNA

（RNeasy Plus）

（Foregene'sKit Pengasingan RNA Jumlah Tumbuhan）

Beritahu anda secara senyap!Kit RNA Foregene juga mempersembahkan Pemadam RNase yang sangat mudah digunakan, yang boleh mengeluarkan sepenuhnya 400μg RNase pada permukaan pepejal dalam masa 1 minit, tanpa menambahkan sebarang bahan toksik pada tubuh manusia!

Pic1: Carta perbandingan proses operasi

Produk Foregene boleh melengkapkan pengekstrakan RNA dalam dua lagu sahaja, jangan buat orang lain cemburu dengan kemajuan percubaan anda!

Pic2:Ekeputusan xperimental carta perbandingan

Generasi pertama (1: TRIzol)

Generasi kedua (2: RNeasy of QIAGEN)

Generasi ketiga (3: QIAGEN's RNeasy plus, 4: Foregene)

Pic3: graf qPCR (graf lengkung penguatan)

Generasi pertama (hijau bermaksud TRIzol -, merah bermaksud TRIzol +)

Generasi kedua (biru langit bermaksud QIAGEN RNeasy-, merah bermaksud QIAGEN RNeasy +)

Generasi ketiga (biru bermaksud QIAGEN RNeasy plus, hijau bermaksud Foregene)

(Nota: graf qPCR “-” menunjukkan bahawa DNase belum ditambah dan pencemaran DNA belum dialih keluar. Oleh itu, CT lebih tinggi dan keputusannya tidak tepat; “+” menunjukkan bahawa DNase telah ditambah dan pencemaran DNA telah dikeluarkan, hasilnya adalah tepat)

Setiap peningkatan teknikal bermakna operasi percubaan berkembang ke arah yang lebih mudah dan lebih mesra pengguna.

Foregene bertujuan untuk membantu lebih ramai penyelidik saintifik menjimatkan masa dan kos percubaan, mendapatkan hasil percubaan berkualiti tinggi, dan bersama-sama mencipta pencapaian penyelidikan saintifik yang lebih berharga.