Enzim Taq permulaan panas digunakan secara meluas.Berbanding dengan polimerase DNA biasa, enzim Taq permulaan panas dapat mengelakkan beberapa penguatan tidak spesifik dan pembentukan dimer primer dengan berkesan, dan dapat meningkatkan kadar kejayaan penguatan gen sasaran dengan berkesan.Terutamanya dalam bidang ujian genetik, enzim Taq permulaan panas telah dikenal pasti sebagai piawaian wajib dalam industri, dan polimerase DNA biasa tidak boleh digunakan.Seperti yang dapat dilihat dari atas, enzim Taq permulaan panas digunakan secara meluas.Pada masa ini, terdapat banyak jenama enzim Taq hot-start di pasaran domestik, tetapi tidak banyak enzim Taq hot-start yang berkualiti tinggi.Berhadapan dengan begitu banyak produk enzim Taq permulaan panas, bagaimana kita harus memilih?

1. Pilih enzim Taq permulaan panas dengan kecekapan amplifikasi yang tinggi

Kecekapan amplifikasi PCR berkait rapat dengan prestasi enzim Taq.Selepas sistem tindak balas enzim Taq yang baik dioptimumkan, kecekapan amplifikasi melebihi 95%, dan julat penguatan jumlah templat awal adalah luas.Penguatan yang memuaskan boleh diperolehi apabila kandungan gen sasaran adalah rendah, dan tidak mudah untuk diracuni apabila jumlah templat tinggi, dan tempoh penguatan eksponen adalah panjang.Untuk enzim Taq dengan prestasi yang lemah, walaupun sistem tindak balas telah dioptimumkan untuk banyak kali, kecekapan amplifikasi masih kurang daripada 90%, bentuk "S" lengkung amplifikasi tidak jelas, cerunnya kecil, dan lengkungnya rata.Apabila jumlah templat rendah, ia tidak boleh dikuatkan, dan apabila jumlah templat tinggi, kesan penguatan tidak sesuai.Oleh itu, pemilihan polimerase DNA dengan kecekapan amplifikasi yang tinggi adalah penting untuk kejayaan PCR dan qPCR.

2. Pilih enzim Taq permulaan panas dengan kuasa enzim yang kuat

Kuasa enzimatik enzim Taq berkaitan dengan kecekapan amplifikasi.Secara amnya, lebih kuat kuasa enzimatik enzim Taq permulaan panas, lebih lama tempoh pertumbuhan eksponen penguatan PCR, lengkung 'berbentuk S' yang lebih tipikal, lebih tinggi nilai isyarat pendarfluor, dan lebih sesuai untuk pengesanan PCR multipleks.Polimerase DNA jenama dengan kuasa enzim yang lemah secara amnya hanya boleh menyokong tindak balas 2-plex.Apabila melakukan tindak balas 3-plex, lengkung amplifikasi adalah rendah, nilai isyarat pendarfluor adalah rendah, dan tiada lengkung amplifikasi biasa, jadi keputusannya sukar untuk dinilai.

3. Pilih enzim Taq permulaan panas dengan sensitiviti tinggi

Secara umumnya, polimerase DNA mempunyai kecekapan amplifikasi yang tinggi dan kepekaan yang tinggi, tetapi terdapat juga ketidakkonsistenan.Jika kelimpahan gen sasaran sampel yang akan dikuatkan adalah rendah, adalah disyorkan untuk menguji kepekaan penguatan enzim Taq.Kaedah pengesanan yang paling biasa adalah untuk menjalankan pencairan kecerunan 10 kali ganda atau 5 kali ganda serpihan plasmid gen sasaran, menjalankan pengesanan PCR pada pencairan yang lebih rendah, dan memilih enzim Taq permulaan panas dengan kepekaan pengesanan yang lebih tinggi.

Dapat dilihat daripada perkara di atas bahawa penyelidik perlu memilih mengikut keperluan eksperimen dan keadaan pembiayaan mereka sendiri.Adalah lebih baik untuk melakukan eksperimen penguatan pencairan kecerunan untuk mengesan kecekapan penguatan dan sensitiviti enzim Taq permulaan panas.

Contoh Foregene's Taq DNA Polimerase:

Foreasy HS Taq DNA Polimerase

Penerangan

Foreasy HS Taq DNA Polymerase ialah polimerase DNA yang dinyatakan dalam bakteria kejuruteraan Escherichia coli oleh teknologi penggabungan semula gen.Enzim digabungkan dengan penimbal tindak balas yang unik, yang menjadikan produk sangat tahan dan serasi, dan boleh terus menggunakan sampel lysate (sistem Foregene Lysis) sebagai templat untuk tindak balas pengesanan.

Permohonan

Pengesanan PCR kualitatif dan PCR kuantitatif templat yang telah dimurnikan dan templat yang tidak ditulenkan.

Kawalan kualiti

1.Tiada aktiviti nuklease eksogen dikesan

2. Kaedah PCR untuk mengesan sisa DNA genomik tanpa perumah

3. Ia boleh menguatkan gen salinan tunggal dalam Genom manusia dengan berkesan

4. Simpan pada suhu bilik selama seminggu, perubahan aktiviti yang tidak ketara

Butiran produk: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/