Kit Pengasingan RNA Jumlah Haiwan Jumlah Pengekstrakan dan Kit Pemurnian RNA untuk Tisu & Sel Haiwan
Penerangan Kit:
Mengekstrak RNA total ketulenan tinggi dan berkualiti tinggi dengan pantas dan cekap daripada pelbagai tisu haiwan.
Tidak perlu risau tentang kemerosotan RNA.Keseluruhan sistem adalah Bebas RNase
Mengeluarkan DNA dengan berkesan menggunakan Lajur Pembersihan DNA
Buang DNA tanpa menambah DNase
Mudah—semua operasi selesai pada suhu bilik
Cepat—operasi boleh diselesaikan dalam masa 30 minit
Selamat—tiada reagen organik digunakan
Ketulenan tinggi—OD260/280≈1.8-2.1
Penerangan Kit
50 Persediaan, 200 Persediaan
Kit ini menggunakanlajur putaran dan formuladibangunkan oleh syarikat kami, yang boleh mengekstrak jumlah RNA ketulenan tinggi dan berkualiti tinggi daripada pelbagai tisu haiwan dengan kecekapan tinggi. Ia menyediakan Lajur Pembersihan DNA yang cekap, yang boleh dengan mudah memisahkan dan menyerap DNA genomik daripada supernatan dan lisat tisu, ringkas dan menjimatkan masa;Lajur RNA sahaja boleh mengikat RNA dengan cekap dan boleh diproses serentak dengan formula unik Banyak sampel.
Keseluruhan sistem adalah Bebas RNase, supaya RNA yang diekstrak tidak terdegradasi;Buffer RW1, Buffer RW2 buffer washing system, supaya RNA yang diperoleh bebas daripada protein, DNA, ion, dan pencemaran sebatian organik.
Komponen kit
| Kit Pengasingan RNA Jumlah Haiwan | ||
| Komponen kit | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 T | 200 T | |
| Penampan RL1* | 25ml | 100ml |
| Penampan RL2 | 15ml | 60ml |
| Penampan RW1* | 25ml | 100ml |
| Penampan RW2 | 24ml | 96ml |
| ddH2O Tanpa RNase | 10ml | 40ml |
| Lajur RNA sahaja | 50 | 200 |
| Lajur Pembersihan DNA | 50 | 200 |
| Arahan manual | 1 keping | 1 keping |
Informasi produk
| Format | Lajur putaran | Komponen penulenan | Lajur foregene, reagen |
| Fluks | 1-24 sampel | Masa setiap persediaan | ~30 min (24 sampel) |
| Empar | Empar meja | Pemisahan pirolisis | Pemisahan emparan |
| Sampel | Tisu haiwan;sel | Jumlah sampel | Tisu: 10-20 mg;Sel:(1-5)×106 |
| Isipadu elusi | 50-200 μL | Jumlah pemuatan maksimum | 850 μL |
Ciri&kelebihan
■ Tidak perlu risau tentang kemerosotan RNA;keseluruhan sistem adalah Bebas RNase
■ Mengeluarkan Lajur Pembersihan DNA yang menggunakan DNA dengan berkesan
■ Buang DNA tanpa menambah DNase
■ Mudah-semua operasi selesai pada suhu bilik
■ Operasi pantas boleh diselesaikan dalam masa 30 minit
■ Selamat-tiada reagen organik diperlukan
■ Ketulenan tinggi -OD260/280≈1.8-2.1
Aplikasi kit
Ia sesuai untuk pengekstrakan dan penulenan jumlah RNA daripada pelbagai tisu haiwan segar atau beku atau sel kultur.
Parameter produk
■ Aplikasi hiliran: sintesis cDNA untaian pertama, RT-PCR, pengklonan molekul, Northern Blot, dsb.
■ Sampel: tisu haiwan, sel kultur
■ Dos: Tisu 10-20mg, Sel(2-5)×106
■ Kapasiti mengikat DNA maksimum lajur penulenan: 80 μg
■ Isipadu elusi: 50-200 μl
Gambar rajah
Kit Pengasingan RNA Jumlah Haiwan dirawat 20mg
Sampel tetikus segar, ambil 5% jumlah tulen RNA 1% agar
Elektroforesis Glikogel
1: Limpa 2: Buah pinggang
3: Hati 4: Jantung
Penyimpanan dan jangka hayat
Kit boleh disimpan selama 24 bulan pada suhu bilik (15–25 ℃) atau 2–8 ℃ untuk masa yang lebih lama.Penampan RL1 boleh disimpan pada suhu 4 ℃ selama 1 bulan selepas menambah β- mercaptoethanol (pilihan).
Artikel yang dipetik
1.JIKA:18.808:Zheng, Q., Qin, F., Luo, R., et al.Nanopartikel Seperti Lipid Bermuatan mRNA untuk Penyuntingan Pangkalan Hati Melalui Pengoptimuman Reka Bentuk Komposit Pusat.Adv.Fungsi.Mater.2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.JIKA:18.187:He X, Hong W, Yang J, et al.Apoptosis sel spontan dalam penyediaan sel stem terapeutik memberikan kesan imunomodulator melalui pembebasan fosfatidilserin.Sasaran Transduksi Isyarat Di sana.2021 Jul 14;6(1):270.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.JIKA:17.97:Dai Z, Liu H, Liao J, et al.Pengubahsuaian tRNA N7-Methylguanosine meningkatkan terjemahan mRNA onkogenik dan menggalakkan perkembangan kolangiokarsinoma intrahepatik.Sel Mol.2021 Jul 29:S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.JIKA:9.225:Cao X, Shu Y, Chen Y, et al.Pengubahsuaian m6A Mettl14-Mediated Memudahkan Penjanaan Semula Hati dengan Mengekalkan Homeostasis Retikulum Endoplasma.Sel Mol Gastroenterol Hepatol.2021;12(2):633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
Kit pengasingan RNA untuk sumber sampel lainboleh didapati:
Sel, tumbuhan, virus, darah, dll.
RNA tidak diekstrak atau hasil RNA rendah
Selalunya terdapat pelbagai faktor yang mempengaruhi kecekapan pemulihan, seperti: kandungan RNA sampel tisu, kaedah operasi, isipadu elusi, dsb.
1. Emparan mandi ais atau kriogenik (4 °C) dilakukan semasa operasi.
Syor: Beroperasi pada suhu bilik (15-25 ° C) sepanjang keseluruhan proses, jangan mandi ais dan sentrifuge pada suhu rendah.
2. Pemeliharaan sampel yang tidak betul atau masa penyimpanan sampel yang berlebihan.
Syor: Simpan sampel pada -80 °C atau beku dalam nitrogen cecair dan elakkan penggunaan beku-cair berulang;cuba gunakan tisu segar atau sel kultur untuk pengekstrakan RNA.
3. Lisis sampel tidak mencukupi.
Syor: Apabila menghomogenkan tisu, pastikan tisu dihomogenkan secukupnya dan sel-sel tisu dipecahkan secukupnya untuk menerangkan pembebasan RNA.
4. Eluen tidak ditambah dengan betul.
Syor: Sahkan bahawa RNase-Free ddH2O ditambah setitik demi setitik ke tengah membran lajur penulenan.
5. Isipadu etanol mutlak yang betul tidak ditambahkan pada Penampan RL2 atau Penampan RW2.
Syor: Ikut arahan, tambahkan isipadu etanol mutlak yang betul kepada Buffer RL2 dan Buffer RW2 dan gaul rata sebelum menggunakan kit.
6. Dos sampel tisu tidak sesuai.
Cadangan: Gunakan 10-20 mg tisu atau (1-5) × 106sel setiap 500 μl penampan RL1, kerana penggunaan tisu yang berlebihan boleh mengakibatkan pengekstrakan RNA berkurangan.
7. Isipadu elusi tidak betul atau elusi tidak lengkap.
Syor: Isipadu elusi lajur penulenan ialah 50-200 μl;jika kesan elusi tidak memuaskan, adalah disyorkan untuk melanjutkan masa peletakan suhu bilik selepas menambah ddH Bebas RNase yang dipanaskan terlebih dahulu2O, cth selama 5-10 min.
8. Lajur penulenan mempunyai sisa etanol selepas pencucian Penampan RW2.
Syor: Jika terdapat sisa etanol selepas mencuci Penampan RW2, sentrifugasi tiub kosong selama 1 minit, masa untuk operasi sentrifugasi tiub kosong boleh ditingkatkan kepada 2 minit, atau lajur penulenan boleh diletakkan pada suhu bilik selama 5 minit untuk mengeluarkan sisa etanol dengan secukupnya.
RNA yang disucikan terdegradasi
Kualiti RNA yang telah disucikan adalah berkaitan dengan faktor-faktor seperti pemeliharaan sampel, pencemaran RNase, dan manipulasi, dan lain-lain.
1. Sampel tisu tidak disimpan dalam masa.
Syor: Jika sampel tisu atau sel tidak digunakan tepat pada masanya selepas pengumpulan, segera simpan kriopsi pada -80 °C atau nitrogen cecair.Untuk mengekstrak RNA, gunakan tisu atau sampel sel yang baru diambil apabila boleh.
2. Pencairan beku berulang sampel tisu.
Syor: Apabila menyimpan sampel tisu, sebaiknya potong kecil-kecil untuk pemeliharaan, dan keluarkan salah satu kepingan apabila menggunakannya untuk mengelakkan pencairan beku berulang sampel dan degradasi RNA.
3. RNase diperkenalkan atau tidak memakai sarung tangan pakai buang, topeng, dsb. semasa operasi.
Syor: Eksperimen pengekstrakan RNA paling baik dilakukan dalam bilik manipulasi RNA yang berasingan dan jadual dibersihkan sebelum eksperimen.
Pakai sarung tangan dan topeng pakai buang semasa percubaan untuk meminimumkan kemerosotan RNA yang disebabkan oleh pengenalan RNase.
4. Reagen tercemar dengan RNase semasa digunakan.
Syor: Gantikan dengan Kit Pengasingan RNA Jumlah Haiwan baharu untuk eksperimen berkaitan.
5. Tiub emparan, petua, dsb. yang digunakan dalam manipulasi RNA tercemar dengan RNase.
Syor: Sahkan bahawa tiub emparan, petua, pipet, dsb. yang digunakan dalam pengekstrakan RNA semuanya Bebas RNase.
RNA yang diperolehi disucikan menjejaskan eksperimen hiliran
RNA disucikan oleh lajur penulenan, jika ion garam, kandungan protein yang terlalu besar akan menjejaskan eksperimen hiliran, seperti: transkripsi terbalik, Northern Blot et al.
1. RNA yang dielusi mempunyai sisa ion garam.
Syor: Sahkan bahawa isipadu etanol yang betul telah ditambahkan pada Penampan RW2 dan lakukan 2 pencucian lajur penulenan pada kelajuan emparan yang ditunjukkan untuk operasi;jika terdapat sebarang sisa ion garam, biarkan lajur penulenan ke Penampan RW2 selama 5 minit pada suhu bilik dan lakukan sentrifugasi untuk memaksimumkan penyingkiran pencemaran garam.
2. Sisa etanol dalam RNA yang dielusi.
Syor: Sahkan bahawa selepas pembasuhan penimbal RW2, lakukan operasi sentrifugasi tiub kosong pada kelajuan sentrifugasi yang ditunjukkan untuk operasi, tambahkan masa operasi sentrifugasi tiub kosong kepada 2 min jika masih terdapat sisa etanol, atau biarkan pada suhu bilik selama 5 minit selepas sentrifugasi tiub kosong untuk memaksimumkan penyingkiran sisa etanol.
