Pengeluar China untuk Precampuran Pekat 2× untuk Sampel Tidak Dimurnikan Masa Nyata Kuantitatif PCR Langsung Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U
Organisasi ini mengekalkan konsep prosedur "pengurusan saintifik, kualiti tinggi dan keutamaan kecekapan, pembeli tertinggi untuk Pengeluar China untuk 2× Campuran Pekat untuk Sampel Tidak Dimurnikan Masa Nyata Kuantitatif PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, Perniagaan kami berdedikasi untuk memberikan pelanggan produk berkualiti tinggi yang ketara dan selamat pada harga yang agresif, membuatkan setiap pelanggan kami berpuas hati dengan perkhidmatan kami.
Organisasi mengekalkan konsep prosedur "pengurusan saintifik, kualiti tinggi dan keutamaan kecekapan, pembeli tertinggi untukChina Taq DNA Polymerase dan Qpcr, Syarikat kami mempunyai kekuatan yang banyak dan memiliki sistem rangkaian jualan yang mantap dan sempurna.Kami berharap kami dapat mewujudkan hubungan perniagaan yang baik dengan semua pelanggan dari dalam dan luar negara berdasarkan manfaat bersama.
Prinsip reka bentuk primer PCR Masa Nyata
Primer Hadapan dan Primer Songsang
Untuk PCR Masa Nyata, reka bentuk primer adalah sangat penting.Primer berkaitan dengan kekhususan dan kecekapan penguatan PCR, dan boleh direka bentuk dengan merujuk kepada prinsip berikut:
- Panjang primer: 18-30bp.
- Kandungan GC: 40-60%.
- Nilai Tm: Perisian reka bentuk primer, seperti Primer 5, boleh memberikan nilai Tm primer.Nilai Tm primer huluan dan hiliran hendaklah sedekat mungkin.Formula pengiraan Tm juga boleh digunakan: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Apabila melakukan PCR, suhu di bawah nilai Tm primer 5 °C biasanya dipilih sebagai suhu penyepuhlindapan (peningkatan yang sepadan dalam suhu penyepuhlindapan boleh meningkatkan kekhususan tindak balas PCR).
- Primer dan produk PCR:
- Panjang produk penguatan PCR primer reka bentuk adalah sebaik-baiknya 100-150bp.
- Primer reka bentuk di kawasan struktur sekunder templat harus dielakkan sebanyak mungkin.
- Elakkan pembentukan 2 atau lebih asas pelengkap antara hujung 3′ primer hulu dan hilir.
- Pangkalan terminal primer 3′ tidak boleh hadir dengan 3 G atau C tambahan berturut-turut.
- Primer itu sendiri tidak boleh mempunyai struktur pelengkap, jika tidak, struktur jepit rambut akan terbentuk, menjejaskan penguatan PCR.
- ATCG harus diagihkan sekata mungkin dalam urutan primer, dan pangkalan terminal 3′ harus dielakkan sebagai T.
Lampiran1:Cell LangsungRT-qPCR Komponen kitt pek tambahan
1.Penyelesaian Lisis Sel
Penyelesaian Lisis Sel | |||
Komponen kit (sistem lisis 24 telaga / telaga) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Bahagiansaya | Penampan CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Penampan ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
BahagianII | Pemadam DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
Campuran RT | |
Komponen kit (sistem tindak balas 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Campuran RT Terus | 800 μl |
ddH Tanpa RNase2O | 1.7 ml × 2 |
Campuran qPCR | ||
Komponen kit (sistem tindak balas 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
Pewarna Rujukan 20× ROX | 40 μl | 200 μl |
ddH Tanpa RNase2O | 1.7 ml | 10 ml |
Organisasi ini mengekalkan konsep prosedur "pengurusan saintifik, kualiti tinggi dan keutamaan kecekapan, pembeli tertinggi untuk Pengeluar China untuk 2× Campuran Pekat untuk Sampel Tidak Dimurnikan Masa Nyata Kuantitatif PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, Perniagaan kami berdedikasi untuk memberikan pelanggan produk berkualiti tinggi yang ketara dan selamat pada harga yang agresif, membuatkan setiap pelanggan kami berpuas hati dengan perkhidmatan kami.
Pengilang China untukChina Taq DNA Polymerase dan Qpcr, Syarikat kami mempunyai kekuatan yang banyak dan memiliki sistem rangkaian jualan yang mantap dan sempurna.Kami berharap kami dapat mewujudkan hubungan perniagaan yang baik dengan semua pelanggan dari dalam dan luar negara berdasarkan manfaat bersama.
Prinsip reka bentuk primer PCR Masa Nyata
Primer Hadapan dan Primer Songsang
Untuk PCR Masa Nyata, reka bentuk primer adalah sangat penting.Primer berkaitan dengan kekhususan dan kecekapan penguatan PCR, dan boleh direka bentuk dengan merujuk kepada prinsip berikut:
- Panjang primer: 18-30bp.
- Kandungan GC: 40-60%.
- Nilai Tm: Perisian reka bentuk primer, seperti Primer 5, boleh memberikan nilai Tm primer.Nilai Tm primer huluan dan hiliran hendaklah sedekat mungkin.Formula pengiraan Tm juga boleh digunakan: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Apabila melakukan PCR, suhu di bawah nilai Tm primer 5 °C biasanya dipilih sebagai suhu penyepuhlindapan (peningkatan yang sepadan dalam suhu penyepuhlindapan boleh meningkatkan kekhususan tindak balas PCR).
- Primer dan produk PCR:
- Panjang produk penguatan PCR primer reka bentuk adalah sebaik-baiknya 100-150bp.
- Primer reka bentuk di kawasan struktur sekunder templat harus dielakkan sebanyak mungkin.
- Elakkan pembentukan 2 atau lebih asas pelengkap antara hujung 3′ primer hulu dan hilir.
- Pangkalan terminal primer 3′ tidak boleh hadir dengan 3 G atau C tambahan berturut-turut.
- Primer itu sendiri tidak boleh mempunyai struktur pelengkap, jika tidak, struktur jepit rambut akan terbentuk, menjejaskan penguatan PCR.
- ATCG harus diagihkan sekata mungkin dalam urutan primer, dan pangkalan terminal 3′ harus dielakkan sebagai T.
Lampiran1:Cell LangsungRT-qPCR Komponen kitt pek tambahan
1.Penyelesaian Lisis Sel
Penyelesaian Lisis Sel | |||
Komponen kit (sistem lisis 24 telaga / telaga) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Bahagiansaya | Penampan CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Penampan ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
BahagianII | Pemadam DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
Campuran RT | |
Komponen kit (sistem tindak balas 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Campuran RT Terus | 800 μl |
ddH Tanpa RNase2O | 1.7 ml × 2 |
Campuran qPCR | ||
Komponen kit (sistem tindak balas 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
Pewarna Rujukan 20× ROX | 40 μl | 200 μl |
ddH Tanpa RNase2O | 1.7 ml | 10 ml |
Manual Arahan: