Kit Pengasingan DNA Tumbuhan Protokol Reagen Kit Pemurnian DNA Tumbuhan Genomik
Spesifikasi
50 Persediaan, 100 Persediaan, 250 Persediaan
Kit ini menggunakan lajur DNA sahaja yang secara khusus boleh mengikat DNA, Foregene protease dan sistem penimbal unik, yang sangat memudahkan penulenan DNA genomik tumbuhan.DNA genomik berkualiti tinggi boleh diperolehi dalam masa 30 minit, yang mengelakkan degradasi DNA genomik.
Membran gel silika DNA sahaja yang digunakan dalam lajur putaran ialah bahan baharu Foregene yang unik, yang boleh mengikat DNA secara berkesan dan khusus, dan memaksimumkan penyingkiran RNA, protein kekotoran, ion, polisakarida, polifenol dan sebatian organik lain.
Komponen produk
| Penampan PL1, Penampan PL2 |
| Penampan PW, Penampan WB, Penampan EB |
| Foregene Protease |
| Lajur DNA Sahaja |
| Arahan |
Ciri&kelebihan
■ Tiada pencemaran RNase: Lajur DNA Sahaja yang disediakan oleh kit memungkinkan untuk mengeluarkan RNA daripada DNA genom tanpa RNase tambahan semasa eksperimen, menghalang makmal daripada tercemar oleh RNase eksogen.
■ Kelajuan pantas: Foregene Protease mempunyai aktiviti yang lebih tinggi daripada protease yang serupa dan mencerna sampel tisu dengan lebih cepat.
■ Mudah: operasi pengekstrakan DNA genomik boleh diselesaikan dalam masa 30 minit.
■ Mudah: Sentrifugasi dilakukan pada suhu bilik, tidak diperlukan sentrifugasi suhu rendah 4℃ atau pemendakan etanol DNA.
■ Keselamatan: tiada reagen organik diperlukan.
■ Kualiti tinggi: DNA genomik yang telah dimurnikan mempunyai serpihan besar, tiada RNA, tiada RNase, dan kandungan ion yang sangat rendah, boleh memenuhi keperluan pelbagai eksperimen.
Aplikasi kit
Sesuai untuk pengekstrakan dan penulenan DNA genomik daripada tisu tumbuhan segar atau beku.
Aliran kerja
Gambar rajah
Penyimpanan dan Jangka hayat
Kit boleh disimpan selama 12 bulan pada suhu bilik (15–25 ℃) dan 2–8 ℃ untuk masa yang lebih lama.
Penyelesaian Foregene Protease Plus mempunyai formula unik, yang aktif apabila disimpan pada suhu bilik untuk masa yang lama (3 bulan);aktiviti dan kestabilannya akan menjadi lebih baik apabila disimpan di4 ℃, jadi disyorkan untuk menyimpannya pada 4 ℃, ingat jangan simpan pada -20 ℃.
Panduan Analisis Masalah
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the extraction of plant genomic DNA, hoping to be helpful to your experiments. In addition, for other experimental or technical problems other than operation instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us: 028-83360257 or E-mali: Tech@foregene.com.
Hasil rendah atau tiada DNA
Biasanya terdapat banyak faktor yang mempengaruhi hasil DNA genom, termasuk sumber sampel, umur sampel, keadaan penyimpanan sampel dan operasi.
DNA genomik tidak dapat diperoleh semasa pengekstrakan
1. Sampel tisu disimpan atau disimpan terlalu lama dengan tidak betul, mengakibatkan kemerosotan DNA genomik.
Syor: Simpan sampel tisu dalam nitrogen cecair atau -20°C;cuba gunakan sampel yang baru dikumpul untuk pengekstrakan DNA genomik.
2. Jumlah sampel yang terlalu sedikit boleh menyebabkan DNA genomik yang sepadan tidak dapat diekstrak.
Cadangan: Untuk sampel tisu yang telah disimpan lama atau mengalami kemerosotan DNA genomik yang teruk, jumlah sampel tisu boleh ditingkatkan dengan sewajarnya untuk mengekstrak DNA genomik yang banyak.Jumlah sampel boleh ditentukan mengikut keperluan DNA, tetapi sampel segar tidak boleh melebihi 100mg, dan sampel kering tidak boleh melebihi 30mg.
3. Sampel tidak dikisar dengan nitrogen cecair atau diletakkan terlalu lama selepas nitrogen cecair.
Cadangan: Semasa pengekstrakan DNA, sampel perlu dikisar sepenuhnya dengan nitrogen cecair untuk memecahkan dinding sel;selepas mengisar, sila pindahkan serbuk sampel ke PL1 yang dipanaskan pada suhu 65°C secepat mungkin (sebaik serbuk tanah cair, DNA genomik akan mula merosot dengan cepat) .
4. Penyimpanan Foregene Protease yang tidak betul mengakibatkan aktiviti berkurangan atau tidak aktif.
Syor: Sahkan keadaan penyimpanan Foregene Protease atau gantikannya dengan Foregene Protease baharu untuk hidrolisis enzimatik.
5. Kit disimpan atau disimpan terlalu lama dengan tidak betul, menyebabkan beberapa komponen dalam kit gagal.
Syor: Beli kit pengekstrakan DNA genomik tumbuhan baharu untuk operasi berkaitan.
6. Penggunaan kit yang tidak betul.
Cadangan: Beli Kit Pengasingan DNA Tumbuhan khusus untuk sampel untuk pengekstrakan dan penulenan DNA genomik tumbuhan.
7. Penampan WB tanpa menambah anhidrat etanol.
Syor: Pastikan anda menambah isipadu etanol mutlak yang betul kepada Buffer WB.
8. Eluen tidak dititiskan ke membran silika dengan betul.
Cadangan: Tambah eluen yang telah dipanaskan pada 65℃titisan ke bahagian tengah membran gel silika, dan biarkan pada suhu bilik selama 5 minit untuk meningkatkan kecekapan elusi.
Pengekstrakan untuk mendapatkan DNA genomik hasil rendah
1. Sampel disimpan atau disimpan terlalu lama secara tidak betul, mengakibatkan kemerosotan DNA genomik.
Syor: Simpan sampel tisu pada -20℃;cuba gunakan sampel tisu yang baru dikumpul untuk pengekstrakan DNA genomik.
2. Jika jumlah sampel tisu terlalu kecil, DNA genomik yang diekstrak akan menjadi kurang.
Cadangan: Sesetengah sampel tumbuhan kaya dengan air, seperti tumbuhan akuatik seperti alga, dsb., dos boleh dinaikkan dengan sewajarnya atau air boleh dehidrasi sedikit sebelum pembedahan.
3. Sampel tidak dikisar dengan nitrogen cecair atau dibiarkan pada suhu bilik terlalu lama selepas dikisar.
Cadangan: Pengisaran nitrogen cecair mestilah mencukupi, dan dinding sel sampel hendaklah dipecahkan sebanyak mungkin;sejurus selepas pengisaran, serbuk sampel hendaklah dipindahkan ke 65℃Penampan PL1 yang dipanaskan terlebih dahulu untuk langkah seterusnya.
4. Tidak menggunakan kit yang betul.
Syor: Gunakan Kit Pengasingan DNA Tumbuhan khusus untuk mengekstrak dan menulenkan DNA genomik tumbuhan.
5. Penyimpanan Foregene Protease yang tidak betul mengakibatkan aktiviti berkurangan atau tidak aktif.
Syor: Sahkan keadaan penyimpanan Foregene Protease atau gantikannya dengan Foregene Protease baharu untuk hidrolisis enzimatik.
6. Masalah eluen
Syor: Sila gunakan Buffer EB untuk elusi;jika menggunakan ddH2O atau eluen lain, pastikan pH eluen adalah antara 7.0-8.5.
7. Eluen tidak dititiskan dengan betul
Cadangan: Sila tambahkan titisan elusi ke bahagian tengah membran silika dan biarkan pada suhu bilik selama 5 minit untuk meningkatkan kecekapan elusi.
8. Isipadu eluen terlalu kecil
Cadangan: Sila gunakan eluen untuk elusi DNA genomik mengikut arahan, sekurang-kurangnya tidak kurang daripada 100μl.
DNA genomik yang diekstrak dengan ketulenan rendah
Ketulenan rendah DNA genomik akan membawa kepada kegagalan atau kesan buruk eksperimen hiliran, seperti: enzim tidak boleh dipotong, dan serpihan gen sasaran tidak boleh diperolehi oleh PCR.
1. Pelbagai pencemaran protein, pencemaran RNA.
Analisis: Penampan PW tidak digunakan untuk mencuci lajur;Penampan PW tidak digunakan untuk mencuci lajur pada kelajuan sentrifugasi yang betul.
Cadangan: cuba pastikan tiada kerpasan dalam supernatan apabila supernatan itu melalui lajur;pastikan anda mencuci lajur penulenan dengan Penampan PW mengikut arahan, dan langkah ini tidak boleh ditinggalkan.
2. Pencemaran ion kekotoran.
Analisis: Lajur pencucian Penampan WB telah ditinggalkan atau hanya dibasuh sekali, mengakibatkan pencemaran ionik sisa.
Syor: Pastikan anda mencuci dua kali dengan Buffer WB mengikut arahan untuk membuang sisa ion sebanyak mungkin.
3. Pencemaran RNase.
Analisis: RNase eksogen ditambahkan pada Penampan;operasi pencucian yang salah dalam Buffer PW akan mengakibatkan baki RNase dan menjejaskan operasi eksperimen RNA hiliran, seperti transkripsi in vitro.
Cadangan: Kit pengekstrakan asid nukleik siri foregene boleh mengeluarkan RNA tanpa RNase tambahan, dan semua reagen dalam Kit Pengasingan DNA Tumbuhan tidak memerlukan RNase;pastikan anda mencuci lajur penulenan dengan Penampan PW mengikut arahan, dan langkah ini tidak boleh ditinggalkan.
4. Sisa etanol.
Analisis: Selepas mencuci lajur penulenan dengan Penampan WB, tiada sentrifugasi tiub kosong dilakukan.
Syor: Ikut arahan untuk sentrifugasi tiub kosong yang betul.
Arahan manual:
Manual Arahan Kit Pengasingan DNA Tumbuhan
