Kit RT-qPCR ForeDirect
Penerangan
Kit ForeDirect RT-qPCR direka untuk penguatan masa nyata langsung RNA daripada koleksi swab tanpa proses penulenan RNA.Kit ini melengkapkan kitaran qRT-PCR dalam masa satu jam.Campuran enzim ialah gabungan optimum Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, RNase inhibitor.Penampan Reaksi mengandungi semua komponen yang diperlukan, termasuk komponen penimbal yang dioptimumkan, Mg2+, dUTP dan dNTP.
Spesifikasi
100T
Komponen kit
Agen pembebasan asid nukleik |
pelindung RNA |
2× Penampan RT-qPCR |
Campuran Enzim(Taq&M-MLV) |
Arahan |
Aplikasi PCR
1. Setelah tiub tindak balas PCR telah disentrifugasi sebentar, letakkannya di dalam tangki sampel alat penguat.
2. Protokol terma
Langkah | Suhu | Masa | Kitaran | |
1 | Transkripsi terbalik | 50 ℃ | 15 minit | 1 |
2 | Pra-denaturasi | 95 ℃ | 1 minit | 1 |
3 | Denaturasi | 95 ℃ | 10 saat | 42 |
4 | Anneal/Sambungan | 60 ℃ | 30 saat |
Catatan:Isyarat pendarfluor dikesan serta-merta selepas langkah lanjutan setiap kitaran.
3. Selepas menetapkan, simpan fail dan jalankan program tindak balas.
Langkah-langkah Operasi
Sebelum penyediaan reagen, semua reagen dalam kit hendaklah dicairkan pada suhu bilik dan dicampur perlahan-lahan.
Penyediaan reagen
1. Sediakan Campuran Pelepasan Asid Nukleik
Komponen | Jumlah setiap Sampel atau Kawalan |
Agen pembebasan asid nukleik | 5μL |
pelindung RNA | 0.5 μL |
2. Sediakan Campuran Tindakbalas
Komponen | Jumlah setiap Sampel atau Kawalan |
2× Penampan RT-qPCR | 15 μL |
Campuran Enzim(Taq&M-MLV) | 1.5 μL |
Primer dan Probe | 1μL |
Penyimpanan dan Jangka hayat
-Kit hendaklah disimpan pada -20± 5℃.Tempoh sah adalah 12 bulan.
-Elakkan kitaran beku-cair berulang (<5 kitaran).