Kit RT-qPCR Terus
Penerangan Kit:
◮ Kit RT-qPCR terus, menggunakan Foreasy Reverse Transcriptase dan Foreasy HS Taq DNA Polymerase yang dibangunkan oleh Foregene, dengan penimbal tindak balas yang unik, menjadikan kit ini mempunyai rintangan dan keserasian yang kuat, dan ia boleh menguji secara langsung tindak balas menggunakan sistem Foregene Lysis sebagai templat.Kit ini boleh memohon untuk kit pengesanan asid nukleik COVID-19 dan pembangunan kit pengesanan asid nukleik bakteria patogen lain.
Penerangan
Kit RT-qPCR Langsung menyediakan penimbal RT-qPCR dibungkus berasingan dan enzim cekap tinggicampuran (Taq、M-MLV、RI), menjadikannya mudah untuk mencipta kit dan sistem belakangpelarasan，dalam pengesahan mudah.
Spesifikasi
500T, 50,000T
Komponen kit
| Kandungan kit (sistem tindak balas 20 μL) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50,000 T | |
| Campuran Enzim Langsung | 500 μL×1 | 50 mL×1 |
| 2× Penampan RT-qPCR Terus | 1 mL×5 | 500 mL×1 |
| Arahan | 1 | 1 |
Langkah-langkah Operasi
Sebelum penyediaan reagen, semua reagen dalam kit hendaklah dicairkan pada suhu bilik dan dicampur perlahan-lahan.
A: Sediakan of templat dan reagen
1. Sediakan templat RNA yang disediakan (Adalah disyorkan untuk menggunakan kit siri Kit Pengasingan RNA Total Foregene untuk mengekstrak dan memurnikan templat RNA) atau sampel produk retak (Adalah disyorkan untuk menggunakan sistem Foregene Lysis), primer khusus(10 μM) dan alat guna guna lain yang berkaitan.
2. Letakkan Penampan RT-qPCR Langsung 2×, ddH2O Tanpa RNase dan Pewarna Rujukan 20× ROX (jika ia's diperlukan) di dalam kotak dengan ais, menjadikan ini cair secara semula jadi, dan dicampur perlahan-lahan.
B: Sediakan of RT-qPCR sistem
Jadual 1 : Sediakan of RT-qPCR system
| Komponen | Kelantangan | Kepekatan akhir |
| 2× Penampan RT-qPCR Terus | 10 μL | 1× |
| Campuran Enzim Langsung | 1μL | |
| Primer Hadapan(10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Primer Terbalik(10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Probe(4 μM) | 1μL | 200nM |
| Templat(RNA atau Lysate) | X μL | |
| Pewarna Rujukan 20×ROX | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Jumlah Isipadu | 20μL |
C: Tetapkan yang RT-qPCR tindak balas program
Jadual 2 : RT-qPCR reaction program tetapan (untuk contoh: dua-langkah kaedah)
| Langkah | Suhu | Masa | Kitaran | Kandungan | |
| 1 | 50 ℃ | 15 min | 1* | 1 | Transkripsi terbalik |
| 2 | 95 ℃ | 1 minit | 1 | Pra-denaturasi | |
| 3 | 95 ℃ | 10 saat | 40-45 | Denaturasi | |
| 60 ℃ | 30 saat 2* | Anneal/Sambungan | |||
Penyimpanan dan Jangka hayat
-Kit hendaklah disimpan pada -20± 5℃.Tempoh sah adalah 12 bulan.
-Elakkan kitaran beku-cair berulang (<5 kitaran).
